摘要：在《Biochemical and Biophysical Research Communications》的一篇報道中，實驗人員通過GDS-80基因槍低壓加速將質粒轉染到血管平滑肌細胞。將兩微克質粒DNA懸浮于5微升PBS中并遞送至VSMC。該方法的轉染效率為25%。研究結果提示缺氧在轉錄水平上誘導血管平滑肌細胞中DDR2的表達，這是由p38mapk通路介導的，并且有助于血管平滑肌細胞的遷移。報告中提供的數據闡明了缺氧在 DDR2 表達和 VSMC 中的作用以及 DDR2 對 VSMC 遷移響應缺氧條件的貢獻。

　　細胞與環境之間的通訊是由特定的細胞表面受體介導的，這些受體將外部信號傳遞到細胞內部。

　　一類重要的信號受體是受體酪氨酸激酶(RTKs)，它在許多基本的細胞過程中起著至關重要的作用。這個家族的兩個成員，盤狀結構域受體1和2(DDR1和2)是不尋常的RTK，因為它們的配體是細胞外基質(ECM)，而不是生長因子樣肽。DDRs與多種膠原蛋白結合，刺激基質金屬蛋白酶(MMP)的產生，后者能消化ECM蛋白，促進細胞遷移。DDR2存在于血管和間充質細胞中，并對I型膠原和Ill型膠原纖維作出反應。研究表明，DDR2在被I型膠原激活后與Src相互作用。因此，DDR2需要Src活性來顯示最大水平的酪氨酸磷酸化。

　　盤狀結構域受體-2(DDR2)是一種與細胞外基質結合的受體酪氨酸激酶。在《Biochemical and Biophysical Research Communications》的一篇報道中，實驗人員研究了缺氧在血管平滑肌細胞(VSMC)DDR2表達中的作用及其機制。

　　缺氧(2.5%O2)誘導血管平滑肌細胞DDR2表達;用p38絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)或p38特異性小干擾RNA(siRNA)的特異性抑制劑(SB203580)治療可消除缺氧誘導的DDR2表達。

　　凝膠轉移實驗表明缺氧增加了DDR2啟動子區Myc-Max-DNA結合活性;SB203580和p38特異性siRNA抑制p38-MAPK活化，阻斷缺氧誘導的DDR2啟動子活性。缺氧還可誘導血管平滑肌細胞的基質金屬蛋白酶-2(MMP-2)活性，增加其遷移。這些VSMC對缺氧的反應被DDR2和p38特異性siRNA抑制。

　　研究人員通過A-490至+66bp大鼠DDR2啟動子構建體。簡言之，用5'-gacagaaggactgcatttaag-3'和5'-gattcaactgtccggccgctt-3'反義引物擴增大鼠基因組DNA。擴增產物用M1ul和Bg1ll限制性內切酶消化，連接到pGL3堿性熒光素酶質粒載體(Promega，Madison，WI)中，用相同的酶消化。DDR2啟動子包含Myc最大保守位點(ACGTG)，位于-258至-254 bp。為了構建DDR2突變體，使用突變試劑盒對Myc Max結合位點進行突變。用GDS-80基因槍低壓加速將質粒轉染到血管平滑肌細胞。將兩微克質粒DNA懸浮于5微升PBS中并遞送至VSMC。該方法的轉染效率為25%。用雙熒光素酶報告分析系統制備細胞提取物，并用光度計測量。

　　研究結果提示缺氧在轉錄水平上誘導血管平滑肌細胞中DDR2的表達，這是由p38mapk通路介導的，并且有助于血管平滑肌細胞的遷移。報告中提供的數據闡明了缺氧在 DDR2 表達和 VSMC 中的作用以及 DDR2 對 VSMC 遷移響應缺氧條件的貢獻。

　　[1] Hypoxia induces discoidin domain receptor-2 expression via the p38 pathway in vascular smooth muscle cells to increase their migration[J]. Biochem Biophys Res Commun, 2008, 374(4):662-667.