摘要：在《Human Gene Therapy》發表的一篇文章中，實驗者用GDS-80低壓基因槍在30psi的可耐受壓力下進行三次轟擊可以產生與在更高壓力下進行一次轟擊相當的轉染效率，這通常會導致嚴重的肝臟撕裂傷。總之，用金DNA基因槍轟擊肝臟是HBT轉染淺表肝細胞的一個潛在的有用的替代方法，特別是因為它不會引起嚴重的肝損傷。

　　雖然體內非病毒基因的投遞對肝基因治療至關重要，但仍存在許多技術障礙。將編碼DNA的增強綠色熒光蛋白(EGFP)包覆在金顆粒(金-DNA)上，溶解于磷酸鹽緩沖鹽(純DNA)，并作為聚合物佐劑(jetPEI)-半乳糖苷酶溶液(聚合物-DNA)制備。采用非病毒方法進行小鼠肝轉染，包括基于流體動力學的純DNA轉染(HBT)、聚合物DNA的轉運和肝內注射、純DNA、金DNA和聚合物DNA的基因槍轟擊。只有HBT和基因槍轟擊產生大量EGFP肝細胞。在優化的條件下，HBT除肝邊緣外，其全肝轉染率為20%。HBT導致明顯的肝梗塞，最突出的是肝邊緣。EGFP肝細胞主要位于淺層。

　　HBT和基因槍轟擊均能有效地轉染小鼠肝細胞。重型肝梗塞阻礙HBT后肝細胞外基因表達。在30 psi的條件下，用加速粒子基因槍反復轟擊金-DNA，是HBT在體內向淺表肝細胞傳遞基因的潛在替代品。

　　在《Human Gene Therapy》發表的一篇文章中，研究人員用增強的綠色熒光蛋白編碼 DNA 進行低壓基因槍轟擊檢查小鼠肝臟轉染的有效性，并將結果與其他化學或物理方法獲得的結果進行比較。結果表明，低壓手持式基因槍僅通過 20-45 psi 的壓力，即可將金 DNA 轟擊到小鼠肝臟中。

　　實驗中，為了確定CTGF與E7 DNA疫苗連接后是否能增強小鼠E7特異性T細胞介導的免疫應答，研究人員用流式細胞術分析了E7特異性CD4+和CD8+T細胞前體的細胞內細胞因子染色。結果證實了接種與E7相關的編碼CTGF的DNA可顯著增強E7特異性T細胞免疫。

　　為了確定E7特異性CD8+T細胞反應的增強是否轉化為E7特異性抗腫瘤保護作用，研究人員進行了體內腫瘤保護實驗，證實了接種CTGF/E7 DNA 增強了表達E7腫瘤細胞系的小鼠的腫瘤保護作用。

　　結果顯示，當CTGF與DNA疫苗中的E7抗原相連時，CTGF可以保護接種的小鼠免受表達E7的腫瘤細胞的致命攻擊。

　　實驗中研究人員發現，用GDS-80低壓基因槍在30psi的可耐受壓力下進行三次轟擊可以產生與在更高壓力下進行一次轟擊相當的轉染效率，這通常會導致嚴重的肝臟撕裂傷。總之，用金DNA基因槍轟擊肝臟是HBT轉染淺表肝細胞的一個潛在的有用的替代方法，特別是因為它不會引起嚴重的肝損傷。

　　在本研究中，實驗人員證明了將HPV16 E7抗原與CTGF DNA連接可顯著提高表達E7的DNA疫苗的效力。

　　實驗中，研究人員在接種后1天或5天取小鼠腹股溝淋巴結，用PE結合抗CD11c抗體流式細胞儀分析了CD11c+細胞百分率，接種小鼠并收集了富含CD11c+的細胞。

　　[1] Gene Gun Bombardment with DNA-Coated Gold Particles Is a Potential Alternative to Hydrodynamics-Based Transfection for Delivering Genes into Superficial Hepatocytes[J]. Human Gene Therapy, 2008, 19(4):391.